Për të reduktuar lidhjen jo-specifike të antitrupave dhe, si pasojë, për të reduktuar sinjalin e sfondit, rekomandohet që përdorni një zgjidhje bllokuese përpara inkubimit me antitrupa Zgjidhja më efektive bllokuese do të të jetë ai që përmban serum nga e njëjta specie në të cilën u ngrit antitrupi dytësor.
Si i parandaloni njollat e sfondit?
Zvogëlimi i trashësisë së seksioneve të indeve mund të ndihmojë në uljen e ngjyrosjes së sfondit. Provoni të prisni seksione më të holla për IHC më të pastër. Është gjithashtu e rëndësishme të keni kujdes që të mos lini seksionet të thahen pasi tharja mund të rezultojë në njolla të larta jo specifike.
Si e optimizoni imunofluoreshencën?
Mikroskopi imunofluoreshencës: 10 këshilla teknike për sukses
- Fiksimi dhe Përmeabilizimi i qelizave. …
- Specifikiteti i antitrupave. …
- Përdorimi i hollimit të duhur të antitrupave. …
- Optimizimi i buferëve dhe agjentëve bllokues. …
- Përdorimi i një dendësie të përshtatshme të qelizave. …
- Ngjyrosje e shumëfishtë. …
- Antrupat sekondarë. …
- Reduktimi i Sfondit.
Çfarë e shkakton ngjyrosjen e sfondit?
Ngjyrosja e sfondit mund të shkaktohet nga lidhja e papërshtatshme e antitrupave ose nga gabimet gjatë përgatitjes së rrëshqitjes së indeve.
A reduktojnë antitrupat dytësorë sinjalet e sfondit?
Antitrupat sekondarë specifikë
F(ab) mund të ndihmojnë në reduktimin e sinjalit të sfondit duke eliminuar lidhjen jospecifike të proteinave IgG që gjenden në inde nga antitrupi dytësor.
