Udhëzime për shkrirjen e qelizave
- Shkrini qelizat e ngrira me shpejtësi (< 1 minutë) në një banjë uji 37°C.
- Hollojini qelizat e shkrira ngadalë përpara se t'i inkuboni ato, duke përdorur një mjedis të rritjes të ngrohur paraprakisht.
- Qelizat e shkrira në pjatë me densitet të lartë për të optimizuar rikuperimin.
- Përdor gjithmonë teknikën e duhur aseptike dhe puno në një kapuç me rrjedhje laminare.
Pse bëhet shkrirja e qelizave?
Është jetike shkrirja e qelizave në mënyrë korrekte për të ruajtur qëndrueshmërinë e kulturës dhe për të mundësuar që kultura të rikuperohet më shpejt. Disa krioprojtës, si DMSO, janë toksikë mbi 4 °C. Prandaj, është thelbësore që kulturat të shkrihen shpejt dhe të hollohen në mjedisin e kulturës për të minimizuar efektet toksike.
Cili është procesi i shkrirjes?
Shkrirja është procesi i marrjes së një produkti të ngrirë nga i ngrirë në një temperaturë (zakonisht mbi 0°C) ku nuk ka akull të mbetur, d.m.th. "shkrirje". Shkrirja shpesh konsiderohet thjesht si ndryshim i procesit të ngrirjes.
Cila është mënyra më e mirë për të ngrirë qelizat?
Ngrini qelizat ngadalë duke ulur temperaturën në afërsisht 1°C në minutë duke përdorur një frekuencë të kontrolluar krio-ngrirës ose një enë krio-ngrirës si Mr. Frosty,” e disponueshme nga laboratori Thermo Scientific Nalgene (Nalge Nunc). Përdorni gjithmonë mjetin ngrirës të rekomanduar.
Si e shkrin një qelizë parësore?
Fshijeni pjesën e jashtme të shishkës së qelizave me 70% etanol ose izopropanol. Në një kabinet biosigurie, rrotulloni kapakun një çerek kthese për të lehtësuar presionin e brendshëm dhe më pas shtrëngojeni sërish. Shkrini shpejt qelizat në një banjë uji 37°C duke rrotulluar butësisht shishkën. Hiqeni shishkën kur të mbetet një sasi e vogël akulli.
