Anali i Komplementimit të Fluoreshencës Bimolekulare (BiFC) është një metodë e përdorur për të vizualizuar drejtpërdrejt ndërveprimin protein-proteinë in vivo duke përdorurimazhe të qelizave të gjalla ose qeliza fikse. … BiFC u përshkrua për herë të parë nga Hu et al.
Si funksionon komplementimi i fluoreshencës bimolekulare?
Parimi i punës së BiFC bazohet në zhvillimin e një kompleksi fluoreshent, si rezultat i lidhjes së dy segmenteve të një proteine fluoreshente kur ato janë në afërsi për shkak të ndërveprimit protein-proteinë në fragmente, d.m.th., në BiFC, një fluorofor ndahet në skajet terminale amino dhe karboksil.
Çfarë është testi BiFC?
Analiza
komplementimi i fluoreshencës dymolekulare (BiFC) mundëson vizualizimin e thjeshtë dhe të drejtpërdrejtë të ndërveprimeve të proteinave në qelizat e gjalla (45). Qasja BiFC bazohet në formimin e një kompleksi fluoreshente kur dy proteina të shkrira me fragmente jo fluoreshente të një proteine fluoreshente ndërveprojnë me njëra-tjetrën (Fig.
Pse bëhet testi BiFC?
Ideja e BiFC është për të shprehur gjysmën e GFP-së të shkrirë me proteinat tuaja të interesit Nëse POI-të ndërveprojnë, ju mund t'i bashkoni të dyja gjysmat për të marrë një GFP funksionale. Pra, nëse ka gjysmën e një GFP të shprehur në qelizë, nuk jam i befasuar që një antitrup GFP mund ta zbulojë atë.
A është BiFC i kthyeshëm?
Parikthyeshmëria e komplekseve BiFC është dokumentuar mirë (10), dhe duket se shumica, nëse jo të gjitha, sistemet e bazuara në proteina fluoreshente janë të pakthyeshme (8, 33, 43, 48-51).
